Medicina / Ciências Médicas e da Saúde

Dissertações de Mestrado

Resumo

O carcinoma da mama é a neoplasia maligna mais comum em mulheres e uma das principais causas de morte por cancro (Ferlay et al, 2007). Um estudo pioneiro (Sjöblom T et al, 2006) revelou que existe ainda um grande número de genes que não foram associados a neoplasias e que poderão fornecer novas indicações sobre a tumorigénese de carcinomas de tipo epitelial. A análise sistemática das alterações somáticas nos genomas de carcinoma da mama e colo-rectal levou à identificação de 189 genes, com uma grande probabilidade de terem sido sujeitos a selecção mutacional durante a tumorigénese, que foram denominados Candidate Cancer Genes, CAN. A identificação destes genes poderá levar a novas vias de investigação básica da biologia tumoral e consequentemente ter implicações ao nível de prognóstico, diagnóstico e de alvos terapêuticos. As percentagens de mutações por substituição de uma única base encontradas nos carcinomas da mama e colo-rectal foram muito semelhantes, porém o espectro e o contexto nucleotídico entre os dois carcinomas eram bastante diferentes, o que poderá ser um reflexo das diferenças nos mecanismos de tumorigénese destes carcinomas. Em cada carcinoma da mama foram identificadas, em média, 52 mutações somáticas nãosinónimas, das quais 9 eram em genes CAN. Neste carcinoma foram detectadas mutações no SIX4, um gene de regulação de transcrição, que não foi anteriormente associado à neoplasia e que poderá estar implicado no processo de tumorigénese. O SIX4 é um membro da família SIX, pertencente ao grupo de genes homeobox divergentes ou de classe II e que apresenta uma estrutura modular, na qual cada exão corresponde a funções concretas. No SIX4 humano, os exões parecem estar organizados em três grupos: o exão 1, que codifica o domínio Six e o homeodomínio de tipo Six, um segundo exão com função desconhecida e o exão 3 que codifica um domínio de activação de transcrição (Ozaki et al, 1999). Esta tese de dissertação pretende contribuir para o esclarecimento do eventual papel do SIX4 na neoplasia da mama. Com esse propósito, propusemo-nos pesquisar alterações somáticas na região codificante do SIX4 em 48 amostras clínicas de pacientes, diagnosticadas com carcinoma ductal da mama. Nas amostras analisadas não foram detectadas alterações somáticas no SIX4, pelo que se pode especular que, como para outros genes homeobox (Goodman & Scambler, 2001), as mutações neste gene não são um evento frequente. Foi detectada uma alteração não-sinónima no exão 3. Embora esta variante alélica já tenha sido descrita e a frequência alélica seja variável entre diferentes populações, a hipótese de esta variante alélica poder causar predisposição para o carcinoma da mama é plausível. Uma vez que o exão 3 codifica o domínio de activação de transcrição do SIX4 é importante tentar esclarecer as eventuais consequências funcionais da alteração e também das mutações somáticas anteriormente detectadas (Sjöblom T et al, 2006). Com esse intuito, propusemo-nos a analisar as consequências funcionais das alterações encontradas, nomeadamente a nível da dosagem de expressão de proteína e da capacidade de transactivação do SIX4. A estratégia delineada para clarificar a função do SIX4 na neoplasia da mama envolveu o desenvolvimento de um vector repórter do grau de activação do complexo de transcrição e de vectores onde é incluído o cDNA de SIX4 humano de referência (com o alelo ancestral) ou com as alterações detectadas, que serão usados para transfectar linhas celulares humanas.

 

Índice

Abreviaturas

Introdução

Oncologia Molecular
Os genes CAN

Os genes Homeobox

Os genes Six

O Six4

A mama

Carcinoma da mama

Classificação morfológica
Dados epidemiológicos

Factores de risco

Padrões de expressão de genes

Estadiamento e Prognóstico
Mecanismos de tumorigénese

Genes Six e carcinoma da mama

Metodologia

Resultados & Discussão

Investigação em curso & Perspectivas futuras
Bibliografia
 

 

ABSTRACT

RESUMO

Tese Mestrado