Medicina / Ciências Médicas e da Saúde

Dissertações de Mestrado

 

Efeito de um protocolo de corrida em plano descendente na funcionalidade de mitocôndrias isoladas de músculo esquelético de ratinho

 

Autor: João Pedro Alvarenga Soares Amado Vitorino
Orientador: José Magalhães, António Ascensão

 

Mestrado em Análises Clínicas

Faculdade de Farmácia

Universidade do Porto
 

 

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Efeito de um protocolo de corrida em plano descendente na funcionalidade de mitocôndrias isoladas de músculo esquelético de ratinho

Resumo

O exercício agudo excêntrico tem um efeito lesivo na homeostasia muscular esquelética e atendendo a este facto, pretendeu-se com este estudo verificar o impacto do exercício com predomínio de contracções excêntricas na funcionalidade de mitocôndrias do músculo esquelético de ratinhos. Trinta ratinhos macho da estirpe Charles River CD-1 (doze semanas, ~40g) foram aleatoriamente divididos em três grupos (n=10/grupo): controlo (C), sacrificados imediatamente após o protocolo agudo de exercício excêntrico (Exc0h) e sacrificados 48 horas (Exc48h) após o mesmo protocolo. O protocolo agudo de exercício excêntrico consistiu num período de 120 minutos de corrida em tapete rolante com -16º de inclinação a uma velocidade média de 16,6m/min. Foram avaliadas a actividade plasmática da creatina quinase (CK), as concentrações de mioglobina (Mb) e interleucina 6 (IL-6) bem como os parâmetros respiratórios associados ao consumo de O2 e ao potencial transmembranar utilizando substratos para o complexo I e II da cadeia
transportadora de electrões mitocondrial. Verificou-se um incremento significativo dos valores de CK, Mb e IL-6 induzido pelo protocolo. O protocolo agudo de exercício induziu uma diminuição do estado 3, ICR (índice de controlo respiratório) e potencial transmembranar (∆Ψ) no grupo Exc0h comparativamente aos restantes, em mitocôndrias energizadas com substatos para o complexo I (malato + piruvato). Foi observado um aumento do estado 4 no grupo Exc0h com succinato na presença de rotenona comparativamente aos grupos C e Exc48h. Adicionalmente, as mitocôndrias foram submetidas a um ensaio “in vitro” de anóxia-reoxigenação e os resultados evidenciaram que o estímulo “in vitro” apenas afectou o estado 3, estado 4 e ICR das mitocôndrias do grupo C mas não das mitocôndrias do grupo Exc0h. As diferenças observadas entre os dois grupos (C e Exc0h) nos parâmetros estado 3 e ICR antes do protocolo “in vitro” persistiram depois do protocolo. Em conclusão, o exercício agudo com predomínio de contracções excêntricas afecta, pontualmente, a funcionalidade mitocondrial, podendo contribuir para a perda da homeostasia e eventual viabilidade celular.

 

Palavras chave: EXERCÍCIO EXCÊNTRICO, CORRIDA EM PLANO DESCENDENTE, BIOENERGÉTICA, MITOCÔNDRIA, LESÃO MUSCULAR, INFLAMAÇÃO, ANÓXIA-REOXIGENAÇÃO, RATINHOS.

 

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Índice de Tabelas

Resumo

Abstract

Abreviaturas

1 – Introdução

2 – Revisão da Literatura

2.1 – Agressão/Lesão muscular esquelética induzida pelo exercício
2.2 – Etiologia e fisiopatologia da agressão/lesão muscular esquelética

2.3 – Impacto do exerício excêntrico

2.3.1 – Morfológico e estrutural

2.3.2 – Sensação retardada de desconforto e funcionalidade muscular

2.3.3 – Bioquímico

2.3.4 – Resposta inflamatória ao exercício excêntrico

2.4 – As mitocôndrias na homeostasia celular do músculo esquelético

2.5 – Adaptações mitocondriais ao exercício agudo

3 – Definições de Objectivos

3.1 – Objectivo geral

3.2 – Objectivos específicos

4 – Material e Métodos

4.1 – Descrição da amostra

4.2 – Protocolo experimental

4.2.1 – Colheita de sangue para as determinações bioquímicas
4.2.2 – Determinação da actividade enzimática da creatina kinase
4.2.3 – Determinação da mioglobina

4.2.4 – Determinação da IL-6 (Interleucina-6)

4.2.5 – Isolamento de mitocôndrias do músculo esquelético

4.2.6 – Determinação da actividade respiratória mitocondrial

4.2.7 – Determinação do potencial eléctrico transmembranar

4.2.8 – Anóxia e reoxigenação

4.3 – Procedimentos estatísticos

5 – Resultados

6 – Discussão

6.1 – Discussão de metodologia

6.2 – Discussão dos resultados

7 – Conclusões
8 – Referências bibliográficas
 

 

Trabalho completo