Conceito de Tecnologia de DNA
Recombinante
A
tecnologia de DNA recombinante pode ser descrita de modo
simplificado como a transferência de um gene de um organismo para outro,
isto é a recombinação de DNA proveniente de diferentes origens. Numa
primeira fase é isolado o gene de interesse (pode ser um gene humano),
com o auxílio de enzimas de restrição, e
introduzido em um vetor (um plasmídeo) que foi também tratado com
enzimas de restrição. A
enzima DNA ligase é utilizada para ligar o
gene ao vetor. Posteriormente, o vetor recombinante é introduzido na
linhagem celular, que pode ser bacteriana,
animal
ou de leveduras. A linhagem celular mais utilizada é geralmente a
bacteriana. Existem alguns métodos para identificar células bacterianas
transformadas, nomeadamente, através de genes de resistência a drogas
que se encontrem nos plasmídeos. Através do processo de clonagem, uma
população pura de células recombinantes é alcançada. A tecnologia de
DNA recombinante permite deste modo expressar o gene de interesse em
maiores quantidades. Os vetores com os genes recombinantes podem ser
induzidos, sob condições controladas, a produzir a proteína em grandes
quantidades. Posteriormente, é possível isolar o extrato proteico e
separar a proteína de interesse.
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